ABSTRACT
La vacunación temprana contra el virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa (por sus siglas en inglés IBDV) es una práctica muy común; sin embargo, el uso de vacunas de baja atenuación puede comprometer la integridad de la bolsa de Fabricio en aves jóvenes generando inmunosupresión y el fracaso de los planes de vacunación. Una alternativa es la utilización de vectores virales para la expresión transgénica de proteínas inmunogénicas que pueden proporcionar protección adecuada sin el potencial daño a la bolsa. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la protección contra un desafío experimental con cepas clásicas conferida por la vacunación al día de edad con VAXXITEK®, un herpesvirus de pavo (por sus siglas en inglés HVT) expresando la proteína inmunogénica VP2 de una cepa clásica del IBDV. Aves libres de patógenos específicos fueron vacunadas al día de edad por la vía subcutánea y luego desafiadas a los 18 ó 28 días de edad con la cepa STC del virus de la enfermedad de Gumboro. El criterio de protección incluyó signos clínicos, índice peso bolsa/peso corporal y la histopatología de la bolsa. En las aves vacunadas con VAXXITEK®, no se observaron signos clínicos o lesiones asociadas al desafío con la cepa STC, ni en el desafío temprano ni en el tardío. El índice bursal resultó significativamente menor en las aves no vacunadas que fueron desafiadas. Estos resultados indican que una dosis de la vacuna HVT-IBDV recombinante protege a las aves contra un desafío con cepas clásicas.
Early vaccination against infectious bursal disease virus (IBDV) is a common practice; however, the use of live attenuated vaccines may sometimes compromise the bursal integrity in young birds generating immunosupression and failures in vaccination programs. An alternative is the use of viral vectors for transgenic expression of immunogenic proteins that can provide adequate protection without the potential bursal damage. The objective of this work was to assess the protection against a classical strain challenge conferred by day-one vaccination using VAXXITEK®, a recombinant herpesvirus of turkey expressing the immunogenic viral protein 2 from a classical IBDV. Specific pathogen free (SPF) one-day old birds were vaccinated by the subcutaneous route and challenged with the STC IBDV strain at 18 or 28 days of age. The protection criteria included: clinical signs, bursa/bodyweight ratio and bursal histopathology. No clinical signs or STC challenge related bursal lesions were observed in the VAXXITEK® vaccinated birds at both early and late challenge. The bursal index was significantly lower in the unvaccinated challenged birds. These results indicate that single dose recombinant HVT-IBDV vaccination protects chickens against a classical strain challenge.
ABSTRACT
Las cepas clásicas del virus de la enfermedad infecciosa de la bolsa (por sus siglas en inglés IBDV) están presentes en la industria avícola venezolana desde el último tercio del siglo pasado, a pesar de la implementación de programas intensivos de vacunación. Recientemente, se ha reportado la presencia de cepas variantes del IBDV en varios países de Latinoamérica. El presente trabajo reporta la identificación, mediante técnicas moleculares, de cepas variantes en granjas avícolas venezolanas. En parvadas de pollos de engorde de cuatro semanas de edad se tomaron bolsas de Fabricio e improntas en la tarjeta Whatman Indicadora Clásica FTA® para evaluación histopatológica y detección molecular, respectivamente. Para la caracterización molecular se utilizó la prueba de reacción en cadena por la polimerasa-transcriptasa reversa (por sus siglas en inglés RT-PCR) acoplada a secuenciación directa de nucleótidos. El peso vivo del ave, el índice peso bolsa/peso corporal, así como el peso y diámetro de la bolsa se consideraron como indicadores de inmunocompetencia a la cuarta semana. Todas las aves muestreadas (n=113) resultaron positivas a IBDV. Los virus provenientes de 10 de las 13 granjas mostraron alta similitud con cepas variantes (A y E). En concordancia con los resultados de RT-PCR, los hallazgos histopatológicos mostraron lesiones relacionadas con IBDV. Los indicadores morfológicos de inmunocompetencia se afectaron significativamente en las granjas donde se detectaron cepas variantes. En Venezuela no se utiliza vacuna viva contra cepas variantes, lo que incrementa el riesgo de inmunosupresión, fallas en los programas de vacunación y la susceptibilidad a enfermedades endémicas.
Classical infectious bursa disease virus (IBDV) has been present in the Venezuelan poultry industry since the last quarter of the past century despite intensive vaccination programs applied to control the disease. Lately, the presence of variant strains has been reported in several Latin-American countries. This work reports the molecular identification of variant IBDV strains in poultry farms from Venezuela. Bursal imprints in Whatman classic indicator FTA® cards and bursa tissues for histopathological analysis were collected from 4-week old broiler flocks. Reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) and direct nucleotide sequence were used for the virus molecular characterization. The bird´s body weight, the bursal index, the bursa weight and diameter were used to assess the immune status at four weeks of age. All the birds sampled (n =113) were IBDV positive. Viruses from 10 out of 13 farms showed high similarity with the IBDV variant strains (variants A and E). Histopathological findings where consistent with the RT-PCR, results showing IBDV related bursa damage in the infected birds. The immune status indicators were significantly affected in the farms where variant strains were detected. No variant strain live vaccination is currently used in Venezuela, increasing the risk of immunossupression, vaccine failure and susceptibility to endemic diseases.
ABSTRACT
Se evaluó la factibilidad de utilizar las tarjetas FTA® (Flinders Technology Associates) para la inactivación y transporte de fluido alantoideo infectado con el virus de la enfermedad de Newcastle (VEN). La tarjetas FTA® fueron impregnadas con diluciones seriadas de fluido alantoideo con un título inicial de 10(8,8) DL/50 del VEN cepa LaSota y analizadas mediante la prueba de reacción en cadena por la polimerasa transcriptasa reversa (por sus siglas en ingles RT-PCR) a las 24 horas, 7 y 14 días. La concentración más baja del virus detectada en el fluido alantoideo fue 10(5,8) DL/50. La detección del virus a partir de la tarjeta fue posible hasta 14 días después de su inactivación. El re-aislamiento viral en huevos embrionados a partir de las tarjetas resultó negativo. La inactivación del virus en las tarjetas no afectó la calidad de la secuencia de nucleótidos, permitiendo la determinación de su virulencia mediante la secuenciación de los nucleótidos que codifican la zona de corte de la proteína de fusión resultando ser lentogénico en concordancia con la cepa inicial de virus aplicada a las tarjetas. Se concluye que las tarjetas FTA® representan una alternativa válida para el muestreo, inactivación y diagnóstico molecular del VEN, con un alto grado de bioseguridad.
The feasibility of using FTA® cards (Flinders Technology Associates) for inactivation and transportation of allantoic fluid infected with Newcastle disease virus (NDV) was evaluated. Serial dilutions of allantoic fluid with a titer of 10(8.8) ELD/50 of LaSota strain NDV were loaded on the FTA® cards and analyzed after 24 hour, 7 and 14 days using reverse transcriptase-polimerase chain reaction (RT-PCR). The lowest virus concentration that could be detected from the FTA® cards was 10(5.8) ELD/50. The detection of the inactivated virus was possible after 14 days of virus inactivation. No virus re-isolation in embryonating eggs was possible from the cards. No negative effects of the FTA® card inactivation on the nucleotide sequences were observed, allowing the determination of its virulence by direct nucleotide sequencing of the F protein cleavage site, resulting in a lentogénic strain in concordance with the initial virus applied on the cards. It can be conclude that FTA® cards are a valid alternative for NDV sampling, inactivation and molecular diagnostic with a high degree of biosecurity.
ABSTRACT
Bajo condiciones de campo del estado Zulia, se probó el efecto de dos planes de vacunación contra la enfermedad de Newcastle (ENC). Se usaron tres grupos de 200 pollos Ross de un día de edad. el primer día se evaluaron serológica e histopatológicamente 20 pollos provenientes del lote a ser utilizado para determinar la calidad inicial y los anticuerpos maternales (AM) contra ENC. Los tratamiento aplicados fueron: T1 Control sin vacunación contra ENC; T2 Hitchner B1B1 por aspersión; T3 cepa enterotrópica (VG/GA) por aspersión + Oleosa subcutánea al día 1, ambos con refuerzos al día 7 y 14 con cepa La Sota en spray y agua respectivamente. En 16 aves de cada tratamiento se estudiaron semanalmente los anticuerpos posvacunales contra ENC a través de Inhibición de la Hemoaglutinación (HI), la respuesta al desafío (día 37) con una cepa velogénica viscerotrópica de ENC (RD) y el grado de alteracción histopatológica en las aves (GL). La data se analizó a través de ANOVA y LS means del paquete estadístico SAS. Los AM promediaron una media geométrica del título (MGT) de 120, no se observaron lesiones hitopatológicas previas al ensayo. Para el T1, T2 y T3 los resultados promediaron una MGT de 7,5/10,7/13,5. En la variable GL no hubo diferencias entre tratamientos, sin embargo se observaron lesiones compatibles con Marek, Gumboro y Micotoxicosis; la RD fue 0 por ciento, 60 por ciento y 90 por ciento de protección respectivamente. La respeuesta serológica a las primeras vacunciones fue inhibida probablemente debido a los altos AM, mientras que la respuesta inmune primaria fue inducida por la tercera vacunación y afectadas por las condiciones de campo. La respuesta inmune humoral y la resistencia al desafío fueron mayores en el T3. Se concluye que bajo condiciones de campo se debe utilizar el plan de vacunación correpondiente al T3
Subject(s)
Animals , Chickens , Dose-Response Relationship, Immunologic , Newcastle Disease , Vaccination , Venezuela , Veterinary MedicineABSTRACT
Bajo condiciones de campo en el Centro Experimental de Producción Animal de la Universidad del Zulia, se evaluó la reacción postvacunal y los parámetros productivos de pollos de engorde en respuesta a la implementación de dos planes de vacunación contra la enfermedad de Newcastle (ENC). Se usaron 3 grupos de 200 pollos Ross de un día de edad. Los tratamientos fueron: T1: Control sin vacunación contra ENC; T2: Cepa Hitchner B1B1 con Spravac al día 1; T3: Cepa enterotrópica (VG/GA) + Oleosa al día 1, ambos con refuerzos al día 7 y 14 (cepa La sota en spray y agua respectivamente). Se determinaron los títulos de anticuerpos maternales (TAM) contra ENC hasta el día 12, a través de inhibición de la Hemoaglutinación, así como el grado de reacción postvacunal durante los primeros 21 días del ensayo a través del Indice de Stress (IS). Por seis semanas se estudió la Ganancia de Peso (GP) Conversión (CON) y Mortalidad (MOR). La data se analizó usando ANOVA del paquete estadístico SAS. Los TAM promediaron una media geométrica del título de 120 durante el período de vacunaciones. Para los grupos T1, T2 y T3 los parámetros productivos promediaron: GP: 2.079g/2.145g/2.192 g; CON: 1,58/1,59/1,45; MOR: 4,6 por ciento/5,4 por ciento)/4,7 por ciento respectivamente. El promedio de IS causado por las vacunaciones contra ENC para los 21 días observados fueron 0,03/0,26 y 0,18 respectivamente. Las reacciones postvacunales fueron inhibidas probablemente por altos TAM encontrados. Ninguna de las variables estudiadas difirió significativamente entre tratamientos. Se concluye que ni la cepa vacunal utilizada, ni el manejo durante el proceso de vacunación contra ENC, evaluados afectaron la reacción postvacunal o respuesta productiva del lote
Subject(s)
Animals , Animal Feed , Chickens , Newcastle Disease , Vaccines , Venezuela , Veterinary MedicineABSTRACT
En base a la relación existente entre la morfometría de los órganos linfoides y la inmunocompetencia de las aves, se estudió el desarrollo de los órganos linfoides, evaluando 24 pollos (Ross) semanales durante seis semanas, provenientes de un lote de 600 aves, criadas bajo condiciones de campo en el Centro Experimental de Producción Animal de la Universidad del Zulia. Se calculó la relación entre el peso de Bursa, Bazo, timo y el peso corporal (Ibu, Iba Iti), entre el peso y el diámetro de la Bursa, así como el coeficiente de correlación (CC) y la razón entre los órganos (Ro). Los órganos linfoides fueron evaluados histopatológicamente, determinándose además los títulos de anticuerpos contra la enfermedad de Newcastle (ENC). Fueron aplicados estadígrafos de posición y dispersión. Se utilizaron la prueba de Correlación de Pierson y Chicuadrado del Paquete Estadístico SAS. El peso vivo inicial fue de 44 gr. promedio y el final de 2.139 gr. Al día 1 el peso de la Bursa, Timo y Bazo fue de 0,06, 0,03 y 0,15 gr respectivamente; alcanzando pesos de 1,14, 2,31 y 7,47 gr al día 42. Ibu aumentó hasta la cuarta semana, descendiendo a partir de esta, Iba e Iti mostraron poca variación. La razón Bursa-bazo disminuyó a partir de la cuarta semana. El timo creció con más rapidez que la bolsa y el bazo. Se obtuvieron altos CC entre el peso corporal, el timo y el bazo, así como entre el peso y el diámetro de la Bursa. Durante la quinta y sexta semanas se observaron alteraciones histopatológicas en Bursa compatibles con enfermedad de Gumboro. La respuesta serológica a la vacunación contra ENC fue deficiente, probablemente debido a la presencia de agentes inmunosupresores. Esto concuerda con la disminución de los indicadores Ibu y Burza/bazo durante ese período. Se concluye que en condiciones de campo los índices morfométricos son una herramienta útil para determinar la inmunocompetencia de las aves
Subject(s)
Animals , Animal Feed , Body Weight , Chickens , Immunocompetence , Spleen , Thymus Gland , Venezuela , Veterinary MedicineABSTRACT
Se evaluó la frecuencia de salmonela en canales de aves y la efectividad de su aislamiento en diferentes medios de cultivo de enriquecimiento y selectivos. Noventa y un canales de pollos fueron tomadas directamente de la cadena de procesamiento de dos plantas beneficiadoras (estado Zulia, Venezuela). Para el aislamiento, fueron usados medios de enriquecimiento y selectivos. Los medios de enriquecimiento incluyeron: Caldo Selenito Cistina (CS) y Caldo Tetrationado (CT). Los medios selectivos incluyeron: Bismuto Sulfito Agar (BSA), Xylosa Lisina Desoxicholato (XLD), Verde Brillante (VB) y Salmonella Shigella Agar (SSA). Cada medio de enriquecimiento fue combinado con todos los 4 medios selectivos, resultando en 8 combinaciones diferentes de medios por muestra. Los análisis estadísticos fueron realizdos con el procedimiento lineal general de SAS, sobre la transformación arcoseno de los porcentajes. El modelo lineal incluyó los efectos de semana, medio de enriquecimiento, medio selectivo y la interacción entre estos últimos. De las 91 canales, 21 resultaron positivas para el aislamiento de salmonela (23,08 por ciento). De los casos que resultaron positivos para salmonela, fueron identificados por serología cuatro (4) S. enteritidis y cuatro (4) S. typhimurium. También fueron aisladas salmonelas del grupo C2 y otras salmonelas no clasificadas. Fue obtenido un porcentaje de aislamiento significativamente mayor (P menor o igual 0,001) cuando fue usado CT (8 por ciento) comparado con CS (1 por ciento). No fue observada diferencia significativa entre los medios selectivos, aunque el mayor porcentaje de aislamiento ocurrió cuando se usaron los medios XLD y BSA. Este estudio confirma la presencia de salmonela en canales de aves, específicamente S. enteritidis y S. typhimurium. El medio CT resultó en mayores porcentajes de aislamientos que el medio CS
Subject(s)
Animals , Animal Feed , Chickens , Salmonella , Venezuela , Veterinary MedicineABSTRACT
Se evaluó la respuesta inmune de pollos (Hubard x Hubard) con la inclusión en la dieta por 42 días de 70 µ/kg de Aflatoxina B1 (AFB1), además de la capacidad de 2,5 mg/kg de Selenio (SE) y el Sacchoromyces cerevisiae 0,1 por ciento (SC) para prevenir la aflatoxicosis. Usando un diseño de experimento factorial con ocho tratamientos y cuatro replicas de 15 aves para cada uno (480 pollos). Los tratamientos fueron: T1= dieta basal; T2= AFB1; T3= SC; T4= AFB1 + SC; T5= SE; T6= AFB1 + SE; T7= SC + SE; T8= AFB1 + SC + SE. Las variables estudiadas fueron: Número de glóbulos blancos (GB); Leucograma (LEU); Títulos de anticuerpos (Gumboro y Newcastle) (TA); Proteínas séricas (PS); Gammaglobulinas (Gamma); Relación albúmina/globulina (alb/glo); índice peso Bursa/peso corporal (Pb/Pc); Porcentaje de linfocitos viables en Bursa (PLV); Grados de lesión de Bursa (GL). Se aplicó un análisis de la varianza (ANOVA). Se realizaron comparaciones de medias usando la prueba de Dunnet. La variable GL. se analizó utilizando Kruskal Wallis todas del paquete estadístico SAS. Los resultados indicaron: la AFB1 disminuyó GB, indujo linfocitosis y heteropenia, disminuyó PS, afectó Pb/Pc e incrementó GL. El selenio incrementó PS e indujo una mayor respuesta celular, además disminuyó GL en presencia de AFB1. La levadura no previno las alteraciones en ninguna de las variables afectadas por la AFB1. Estos resultados sugieren que la exposición constante a bajas dosis de AFB1 afecta la respuesta inmune de los pollos de engorde y que la utilización de selenio a 2,5 mg/kg previene este efecto, no así el Saccharomyces cerevisiae a la dosis utilizada